山形大学　遺伝子実験施設

　平成１7年３月１４日（月）～18日（金）の5日間にわたり，山形大学遺伝子実験施設において， DNA組換え実験の基礎テクニック技術研修を行います。つきましては，下記の要領で，受講者を募集します。
＜目的＞
本トレーニングコースは，研究者が DNA組換え実験を研究の中に取り入れるために，一連の基本テクニックを修得することを主要な目的としています。
＜受講対象者＞
主として山形大学内の研究者（大学院生および職員）および県内外の学外研究者とします（学部学生は対象外）。受講者は，全日参加を前提とし，個人単位または二人一組（日程の都合で，交代で参加する場合でも問題ありません）で実習に取り組んで頂きます。また，学生教育研究災害障害保険等に加入していることが望ましいです。
＜定員＞
１６名（組）まで。山形大学外の研究者に対しては，最低４名の受講枠を設けます。二人一組で実習に参加される場合は，共同で実習を進めてください。
＜受講料＞
１万７千円（ただし，二人一組で参加の場合は，一人あたり，１万円）
＜納付方法＞
学内受講者は「国立学校　校費」の振替。医学部事務を通じて各受講者の所属部局に事務手続きを行います。学外の受講希望の方は，お問い合わせください。
＜宿泊＞
小白川地区にある山形大学宿泊施設は，本施設がある飯田地区から離れており，利用には不便なため，学内宿泊施設の斡旋は致しません。飯田地区または山形駅周辺の市中の宿泊施設を利用してください。
＜申し込み方法＞
申込み様式(excel file)に氏名（フリガナ）・年齢・連絡先（電話番号・E-mailメールアドレス）・所属（大学院生の場合，専攻学年まで記入）・テキスト送付先住所郵便番号・組換えDNA実験経験の有無（有の場合は経験年数および実験内容）・受講期間中の緊急時連絡先を記入して，山形大学遺伝子実験施設まで，E-mailで申し込んでください。
＜申し込み・問い合わせ先＞
〒990-9585　山形県山形市飯田西2-2-2　山形大学遺伝子実験施設
担当：中島（iden@med.id.yamagata-u.ac.jp）
TEL: 023-628-5902; FAX: 023-628-5900
【実習内容】
(A) GFP融合タンパク質産生用の組み換えベクターの構築，培養細胞へのDNAの導入および観察
(B) PCRによるcDNAからの目的DNAの増幅（RT-PCR），PCR産物のクローニング，DNAシークエンス
(C) 組織からのRNA抽出，cDNAの合成，発現確認のための，PCRによる目的DNAの増幅（RT-PCR）
(D) マウスゲノムDNAの抽出，PCRによる目的遺伝子有無の確認
【実習日程】
2日目以後、午前8:30から講義を行う場合があります。
３月１４日（月）
午前8:30-9:00 講義
午前9:00-12:00
(A) 組換ベクター構築のためのplasmid DNAの制限酵素処理，DNA電気泳動
午後13:00-1800
(A) DNA断片のゲルからの回収（NaI法）・組換（ライゲーション），大腸菌への組換DNA導入（トランスフォーメーション）・プレートへの植菌
３月１5日（火）
午前9:00-12:00
(A) シングルコロニーからの大腸菌の培養（～９時間）
(B) cDNAを鋳型としたPCRによる特定DNAの増幅（RT-PCR）・カラムによるそのPCR産物の精製
午後13:00-18:00
(B) PCR産物のクローニング（TAクローニング），大腸菌へのplasmid導入・プレートへの植菌（ブルーホワイトアッセイ法を用いて組換体を選別）
(C) 組織からのRNAの抽出（AGPC法）
(A) plasmid DNAの精製（プラスミド自動抽出機を使用）
３月１6日（水）
午前9:00-12:00
(B) シングルコロニーからの大腸菌の培養（～９時間）
(A) 組換体確認のための，plasmid DNAの制限酵素消化・電気泳動
午後13:00-18:00
(C) RNAからのcDNA合成，RT-PCR・電気泳動
(B) plasmid DNAの精製（プラスミド自動抽出機を使用）
３月１7日（木）
午前9:00-12:00
(B) 組換体確認のための，plasmid DNAの制限酵素消化・電気泳動
(A) 細胞導入用plasmidの精製，培養細胞への遺伝子導入
午後13:00-18:00
(B) Dye Terminator法によるクローン化DNAのシークエンス（ABI3100を使用）
(D) マウス組織の採取，Proteinase Kによる消化
３月18日（金）
午前9:00-12:00
(D) マウスゲノムDNAの抽出，ゲノムDNAを鋳型としたPCR
(A) 蛍光顕微鏡による培養細胞におけるGFP発現の観察
午後13:00-16:00
(D) PCR産物の電気泳動
(B) シークエンスDATAの解析
修了証授与